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你更偏好于哪一種酶聯(lián)免疫檢測(cè)方式呢?

更新時(shí)間:2014-10-14 點(diǎn)擊量:1042

    現(xiàn)如今,酶聯(lián)免疫檢測(cè)方式有多種,您可以根據(jù)自己的偏好來選擇。我公司的科研檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品一批上市了,如有購(gòu)買需要可及時(shí)同我們銷售人員取得,您的信任就是我們不斷進(jìn)取的zui大動(dòng)力。
·雙抗體夾心法
 1. 將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
 2. 加受檢標(biāo)本:使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)間,讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合,形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。
 3. 加酶標(biāo)抗體:使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。
 4. 加底物:夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。
    
·雙位點(diǎn)一步法
    在一步法測(cè)定中,應(yīng)注意鉤狀效應(yīng),類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象。當(dāng)標(biāo)本中待測(cè)抗原濃度相當(dāng)高時(shí),過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成夾心復(fù)合物,所得結(jié)果將低于實(shí)際含量。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)甚至可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
   
·間接法測(cè)抗體 
  1.將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
  2.加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合,在洗滌過程中被洗去。
  3.加酶標(biāo)抗抗體:與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合,從而使該抗體間接地標(biāo)記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測(cè)人對(duì)某種疾病的抗體,可用酶標(biāo)羊抗人IgG抗體。
  4.加底物顯色:顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體的量。
    本法只要更換不同的固相抗原,可以用一種酶標(biāo)抗抗體檢測(cè)各種與抗原相應(yīng)的抗體。
    
·競(jìng)爭(zhēng)法  
  1.將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體。洗滌。
  2.待測(cè)管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應(yīng)。如受檢標(biāo)本中無抗原,則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。上海恒遠(yuǎn)生物說明,如受檢標(biāo)本中含有抗原,則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會(huì)與固相抗體結(jié)合,競(jìng)爭(zhēng)性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機(jī)會(huì),使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原,保溫后,酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)zui充分的量。洗滌。
  3.加底物顯色:參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原zui多,故顏色zui深。參考管顏色深度與待測(cè)管顏色深度之差,代表受檢標(biāo)本抗原的量。待測(cè)管顏色越淡,表示標(biāo)本中抗原含量越多。
    
·捕獲法 
  1.將抗人IgM抗體連接在固相載體上,形成固相抗人IgM。洗滌。
  2.加入稀釋的血清標(biāo)本:保溫反應(yīng)后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分。
  3.加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌。
  4.加入針對(duì)特異性的酶標(biāo)抗體:使之與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)結(jié)合。洗滌。
  5.加底物顯色:如有顏色顯示,則表示血清標(biāo)本中的特異性IgM抗體存在,是為陽(yáng)性反應(yīng)。

    以上方法中您zui偏好哪一種呢?一般ELISA檢測(cè)的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物,抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶,而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物。ELISA的結(jié)果檢測(cè)還包括放射性檢測(cè)、熒光檢測(cè)、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測(cè)等。