我們今天來(lái)給朋友們介紹一個(gè)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，我公司所代理的酶聯(lián)免疫試劑盒因質(zhì)量的、價(jià)格的合理再加上銷售部的完善支持使得朋友們的信任，同時(shí)上海恒遠(yuǎn)在這里也表示非常的感謝。今天上午我公司楊發(fā)來(lái)一則實(shí)驗(yàn)說(shuō)要特別分享給大家，下面我們就來(lái)看看用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)瘤壞死因子的過(guò)程步驟。
原理：
    在微孔反應(yīng)板上包被抗人TNF-α單克隆抗體，待測(cè)標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的TNF-a會(huì)與單克隆抗體結(jié)合，游離的成分被洗去，同時(shí)加入生物素化的抗人TNF-α抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素。生物素與親和素特異結(jié)合，抗人TNF抗體與結(jié)合在單克隆抗體上的人TNF-α結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色劑，若反應(yīng)孔中有TNF-α，HRP會(huì)使無(wú)色的顯色劑呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液變黃色。在波長(zhǎng)450nm處測(cè)吸光度，TNF濃度與吸光度成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中的TNF-α濃度。
試劑、材料所需：
    1、預(yù)包被微孔反應(yīng)板
    2、濃縮酶結(jié)合物
    3、酶結(jié)合物稀釋液
    4、標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本稀釋液
    5、濃縮生物素化抗體
    6、IFN標(biāo)準(zhǔn)晶
    7、濃縮洗滌液
    8、顯色劑A、B
    9、終止液
    10、酶標(biāo)儀或全自動(dòng)酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀 
步驟
    1、在微孔反應(yīng)板相應(yīng)孔中分別加入待測(cè)樣本、不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品100txl，再加生物素化抗體工作液50tzl。
    2、振蕩混勻，置20-25℃環(huán)境中溫育120min。
    3、將孔內(nèi)液體吸干，用洗滌液充分洗滌5次，干燥。
    4、除空白孔外，加入酶結(jié)合物工作液100u1。
    5、振蕩混勻，置20-25℃環(huán)境中溫育30min。
    6、將孔內(nèi)液體吸干，用洗滌液充分洗滌5次，干燥。
    7、每孔加入顯色劑A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37C環(huán)境中避光顯色10min。
    8、加入終止液50ul后，輕輕振蕩混勻。用酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng))測(cè)定各孔吸光度，與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照，求出TNF值。
    以上就是今天的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容了，我公司的五折*還剩下十天，需要的朋友們快來(lái)訂購(gòu)酶聯(lián)免疫試劑盒哦！zui后我們來(lái)看下實(shí)驗(yàn)中您需要注意的六條事項(xiàng)：
    1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)在室溫環(huán)境中平衡30min后方可使用，未用完的微孔條用自封袋密封保存。
    2、酶標(biāo)板洗滌時(shí)各孔均需加滿洗滌液，防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。應(yīng)設(shè)定30～60s的洗滌浸泡時(shí)間。
    3、滴加試劑前應(yīng)將滴瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使液體混勻。滴加時(shí)瓶身應(yīng)保持垂直，以使滴量準(zhǔn)確。
    4、所有樣品和廢棄物都應(yīng)按傳染源處理。終止液為2mol／L硫酸，使用時(shí)應(yīng)注意安全。
    5、每批樣本應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
    6、若標(biāo)本OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定范圍以外，應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測(cè)。