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注意幾點(diǎn)即可防止胎牛血清培養(yǎng)中黑點(diǎn)的

更新時(shí)間:2019-06-20 點(diǎn)擊量:829

近有客戶咨詢胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)中黑點(diǎn)如何防止?對(duì)此我司經(jīng)過詳細(xì)分解,得出以下結(jié)論,為防止客戶由于操作方面而使黑點(diǎn)的辦法。對(duì)此一定要做好以下幾點(diǎn)。方可使細(xì)胞培養(yǎng)順利。

(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。 
(2) 培養(yǎng)基無需 37℃水浴。 
(3) 培養(yǎng)基保持PH 值 7.0- 7.2。 
(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗。 
(5) 掌握細(xì)胞傳代的時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長過老。
1、化凍 將血清從-20 度冰箱中取出,室溫(或浸于自來水中)化凍(約需要 30 分鐘至 2 小時(shí),也可放于 4 度冰箱化凍過夜;化凍后若不馬上滅活,可以放入 4 度冰箱中暫時(shí)保存) 
2、滅活 
(1)放入室溫的水浴鍋內(nèi)開始加熱(同時(shí)放入一個(gè)空的血清瓶,內(nèi)裝 100ml 自來水,插入一根溫度 計(jì),溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn)) 
(2)當(dāng)溫度計(jì)顯示 56 度時(shí),停止加熱,改為間斷加熱,維持 56 度(±0.5 度)30 分鐘(±3 分鐘; 若不小心使溫度上升超過 56 度,則:若仍未超過 60 度,且時(shí)間很短,比如不超過 5 分鐘,則仍可使 用;若超過 60 度,或者時(shí)間較長,則棄去不用,或者嘗試用于一些普通細(xì)胞的培養(yǎng)) 
(3)取出,自然冷卻至室溫(約需 1-3 小時(shí)) ,可分裝或-20 度繼續(xù)凍存。
 3、分裝 
(1)轉(zhuǎn)入無菌間,在超凈臺(tái)內(nèi)將血清分裝入 10ml 離心管中(注意預(yù)先要將血清輕輕搖動(dòng)數(shù)周、混勻; 用吸液管或吹大管吹出血清時(shí)要注意:不要吹出氣泡(血清很粘稠,很容易產(chǎn)生氣泡;如果產(chǎn)生氣泡, 則在酒精燈火焰上過一下) ) 
(2)放入-20 度冰箱凍存 
(3)全部操作約需要 4-6 小時(shí)

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